杜鹃花组织培养技术

是杜鹃花,杜鹃花科常绿或落叶灌木，品种多、开花早、花色丰富、花期长。近年来，由于扦插繁殖技术的发展，我国杜鹃花的产量有所增加。但是珍贵品种由于母本少，繁殖系数低，仍然不能满足社会的需求。组织培养是实现杜鹃花工厂化育苗的有效措施。简要介绍如下：

一、杜鹃花组织培养的基本技术环节

在杜鹃花的组织培养中，通常使用的外植体是茎尖、茎节和花芽。因为芽分化难，周期长；茎尖的取材受到限制，我国初代培养多采用茎节作为外植体。处理时，能力较强的氯化汞易造成外植体材料褐变和死亡，不宜使用。实验表明，使用次氯酸钙溶液或5%次氯酸钠溶液的饱和上清液作为药剂效果较好，处理时间为15 ~ 20分钟。加入水果，还可以加入1%的克菌丹或0.1%的吐温-20(山梨醇)。材料的预处理，通常浸泡在70%的酒精中，不超过30秒。此外，用中性洗涤剂对材料进行预处理也能有效降低后续污染率。外植体材料的工艺是：洗衣粉溶液浸泡20分钟？用流水冲洗干净？70%酒精浸泡30秒？用水冲洗1分钟？在5%的次氯酸钠中浸泡15分钟？用水冲洗3次，每次1分钟。因此，外植体的污染率可以降低到15%以下。杜鹃花组织培养所用的培养基是安德森氏改良MS培养基：MS培养基中硝酸铵和硝酸钾的用量减少到1/4，取消了碘化钾，铁盐用量增加了一倍。由于杜鹃花科植物原产于高山酸性土壤，培养基的pH值应为5.0至5.4。孵化温度为25，光照强度为3000勒克斯，光照时间为12至14小时。杜鹃不同于其他植物的芽诱导培养，需要活性强的细胞分裂素才能达到满意的效果。实验表明，ZT的芽诱导效果显著。当添加KT时，几乎没有丛生芽或侧芽，只有原茎尖的伸长。而6-BA处理会加重培养料的褐变，但效果不如对照。另外，在后续的增殖培养中，对于细胞分裂素的种类，还是在杜鹃花中添加ZT比较好。国外在杜鹃花的组织培养中，使用2ip作为外源细胞分裂素，效果优于ZT。但是，从经济的角度来看，还是推荐ZT。

二、杜鹃花的初代和继代培养。

在杜鹃花的初始芽诱导培养中，NAA的浓度不应超过0.1 mg/L，增加ZT剂量可明显促进芽诱导效果。但是，当增加ZT浓度时，NAA浓度不应同步增加，ZT/NAA值要好得多。从经济培养的意义出发，ZT5 NAA0.01 (mg/L)的比例对于初始培养是合适的。经过一个月左右的培养，芽诱导率可达100%，芽诱导系数为6.5。杜鹃继代培养对细胞分裂素的需求低于初代培养。虽然随着ZT剂量的增加，增殖效应仍在增加，但不如初始培养时明显。此外，用于增殖培养的材料性质不同，增殖效果也不同，品种间也有显著差异。供试品种中，以丛生芽为增殖培养基的‘小桃红’增殖系数较高(7.6)；相反，‘花春雨’在服用芽条时反应最好(7.5)。杜鹃花组织培养从接种到诱导出芽所需的时间明显长于月季和菊花，因此继代培养的周期更长。在实验中，以30天和45天为培养周期进行统计。在所有处理水平中，培养45天的增殖芽总数比培养30天的高50%至80%。因此，在杜鹃花的组织培养过程中，过于频繁的扦插和转化培养不能达到快速繁殖的目的